Odrojdie rară, rezistentă la frig și acizi, a fost identificată într-o pastă pe bază de plante utilizată metoda „Lamp”, implementată de Adria cu ajutorul unor prime specifice. Acest feedback, prezentat la CFIA 2025, ilustrează posibilitățile oferite acestei tehnologii de detectare rapidă.
În cadrul CFIA 2025, Adria a prezentat un studiu de caz concret al metodei Lamp (Loop-mediated Isothermal Amplification), ilustrând potențialul pentru detectarea țintită a contaminanților microbiologici.
„ Sunt aici să vă spun o poveste cu final fericit ”, a declarat Nicolas Nguyen Van Long, doctor în microbiologie la Adria.
Povestea începe cu un IMM agroalimentar european, specializat în produse tartinabile organice fără conservanți, care se confruntă cu modificări recurente ale produselor sale: umflături, bule, colonii vizibile. În ciuda mai multor măsuri corective, originea problemei a rămas neclară. Produsul în cauză, o cremă tartinabilă din produse vegetale, ambalată într-un borcan, păstrată la rece și formulată cu o formulă acidă, teoretic nu era propice dezvoltării drojdiilor.
Kazachstania barnettii : o drojdie care trece de radarul metodelor convenționale
Investigații Adaugă o drojdie puțin cunoscută: Kazachstania barnettii, care este rezistentă la acid, capabilă să se dezvolte la 4°C și care să fie dificil de detectat metode convenționale.
„ Este un produs acid, care în mod natural nu permite creșterea microorganismelor sau a drojdiilor. O rețetă istorică care nu a pus probleme de ani de zile. Și de la schimbarea furnizorului, a existat o modificare sistematică ”, a descris el.
Analizele au vegetale că anumite materii prime, în special bulbii, erau contaminate în mod natural cu drojdie. Un diagnostic mai amplu și teste specifice au relevat că drojdia Kazachstania barnettii era responsabilă. This drojdie prezinta caracteristici neobișnuite: rezistență la acizi organici (inclusiv acid acetic), posibilă creștere la 4°C și producție ridicată de gaze. A fost găsită în mod special în cantități semnificative pe o mașină de ambalat.
„Această drojdie este capabilă să crească în condiții care se presupune că sunt nefavorabile dezvoltării sale și să producă gaz. Începem să verificăm cerințele în ceea ce privește problema”, a explicat Nicolas Nguyen Van Long.
Detectie țintită: implementarea metodei Lamp
Pentru a confirma această ipoteză și a viza cu precizie contaminantul, echipele Adria au implementat o constatare rapidă și specifică de detectare genetică: Lamp (Loop-mediated Isothermal Amplification – Amplificare Izotermă mediată de buclă). This tehnic de amplificare izotermă a ADN-ului nu necesită un termociclator și poate produce rezultate în mai puțin de o oră. Se distinge prin ușurința în utilizare, viteza și adaptabilitatea mediilor industriale, unde constrângerile de timp și manipulare sunt mari.
Avantajul constă în faptul că Lamp poate detecta microorganisme care scapă metodelor tradiționale, cum ar fi culturile sau PCR-ul standard. Este deosebit de eficient în matrici complexe și cu niveluri scăzute de contaminare.
„ Cheia este dezvoltarea acestor primi specifici. Complexitatea rezidă în asta ”, explică microbiologul.
Cartografierea contaminării și validarea măsurilor corective
Rezultatele obținute utilizare metoda Lamp au permis:
- Identificarea contaminării masive pe o anumită mașină din linia de producție;
- Dezvăluirea unui nivel ridicat de contaminare a anumitor bulbi de legume utilizați în rețetă;
- Ghidarea acțiunilor corective prin cartografierea precisă a contaminării.
„ Am reușit să demonstrăm producătorului că, în acest caz, curățarea lor cu abur este. Și să le spunem: tot ce trebuie să faceți este să vă spălați ceapa în acest fel, cu această concentrație, pentru a scăpa de drojdia în cauză”, subliniază Nicolas Nguyen Van Long.
Extinderea abordării la alți germeni și medii industriale
Beneficiile metodei LAMP nu se limitează la acest caz.
„De asemenea, metoda răspunde nevoilor foarte rapid, în special în cazurile în care diversitatea microorganismelor implicate este și mai mare”, explică Nicolas Nguyen Van Long. Aceasta poate fi transpusă și la alți germani patogeni sau de alterare, în special:
- drojdii care sunt puțin cunoscute sau nu pot fi identificate prin cultură,
- bacterii specifice unui proces sau unui mediu,
- matrici sensibile sau complex (produse acid, grase, bogate în zahăr etc.).
„După ce ați stabilit contaminarea, există numeroase instrumente disponibile. Nu veți fi niciodată singuri atunci când vă confruntați cu o contaminare patogenă. Cu toate acestea, atunci când vă confruntați cu alterarea, vă aflați imediat singuri ”, observă microbiologul. „Este important să-ți abordeze tipul pâlniei, să înceapă de la general la particular, să nu-ți vezi nici o sursă de contaminare, dar și să-ți găsești o situație de detectare adecvată”, conchide el.
